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SERVICIO DE MICROSCOPÍA IPBLN GRANADA

MICROSCOPIO CONFOCAL LEICA TCS SP5
CARACTERISTICAS GENERALES

Equipado con Cabina para Experimentos de Célula Viva, preparado para experimentos de larga duración

(time lapse ), con condiciones de Temperatura y CO2 contraladas.

Platina motorizada XY para la realización de experimentos en múltiples posiciones.

Láseres que tenemos en el microscopio confocal LEICA TCS SP5

  • Diodo Ultravioleta con una frecuencia de 405 nm para fluorocromos como el DAPI
  • Láser de Argón que dan frecuencias de 458 nm, 476 nm, 488 nm, 496 nm, 514 nm. Van desde el azul hasta el amarillo.
  • Láser de HeNe con una frecuencia de 543 nm. (Es de baja potencia) Básicamente es verde.
  • Láser de HeNe con una frecuencia de 633 nm. (Es de baja potencia) Rojo lejano.
Objetivos que poseemos actualmente:
  • Objetivo 10x seco se puede utilizar para campo claro, contraste de fases y contraste de polarización, no está disponible para DIC.
  • Objetivo 40x de aceite
  • Objetivo 63x de aceite
  • Objetivo 100x de aceite.
En ellos se pueden utilizar para DIC y microscopia confocal, para UV se recomiendan sólo utilizar el 40x y 63x ya que poseen sus lentes correctoras, el de 100x se ve pero no posee lente correctora de UV.
Poseemos lámpara de fluorescencia con filtros Ultravioleta, verde y azul, pero principalmente su uso son como buscadores para después utilizar el confocal.
Los filtros poseen estas longitudes de onda:
  • Filtro A: UV BP 340-380 para visualizar de 400 a 425 por encima no deja pasar nada
  • Filtro I3: Verde BP 450-490 para visualizar de 510 a 515 por encima no deja pasar nada
  • Filtro N21 Rojo BP 515-560 para visualizar de 580 a 590 por encima no deja pasar nada
No poseemos cámara fotográfica para fluorescencia.
Los cubres a emplear para que la eficacia de la observación sea máxima son cubres de 1 ½ ó 0’17 mm.

• Software incluido en la estación de trabajo

  1.  Software LAS-AF para el control de la exploración, adquisición de series multidimensionales (x,y,z,t, "), visualización, procesado bidimensional, cuantificación, y documentación de la imagen.
  2.  Software LAS-AF 3D para la reconstrucción tridimensional de imágenes.
  3. Software LAS-AF Microlab (aplicaciones de biología analítica):
                 FRET Acceptor Photobleaching(Fluorescence Resonant Energy Transfer Acceptor Photobleaching)
                 FRET Sensitized Emission (Fluorescence Resonant Energy Transfer Sensitized Emission)

                             Análisis tridimensional de muestras biológicas:

                 FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching)
                 FRAP XT (Fluorescence Recovery After Photobleaching XT Mode)

                 FLIP (Fluorescence Loss in Photobleaching)
                 Flymode FRAP permite la adquisición de datos en experimentos
                 FRAP (o equivalentes)
con menor retardo con un retardo mínimo: 0,35 milisegundos.
                    Permite la adquisición de
datos “después de la fotoextinción” en fracciones de milisegundos.

   

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