El polimorfismo His452Tyr del receptor humano 5-HT2A afecta las redes de señalización inducidas por clozapina tal como revela el análisis de fosfoproteómica cuantitativa.
Sandra M. Martín-Guerrero, Paula Alonso, Alba Iglesias, Marta Cimadevila, José Brea, M. Isabel Loza, Pedro Casado, David Martín-Oliva, Pedro R. Cutillas, Javier Gonzalez-Maeso, Juan F. López-Giménez.
Biochemical Pharmacology, Febrero 2021
RESUMEN
Los fármacos antipsicóticos constituyen en la actualidad el tratamiento estandarizado para la esquizofrenia. Aunque estos fármacos reconocen directamente el sitio de unión ortostérico de numerosos receptores monoaminérgicos acoplados a proteínas G (GPCRs), en particular los antipsicóticos de segunda generación como la clozapina, todos tienen en común una afinidad muy alta por los receptores de serotonina 5-HT2A (5-HT2AR). Mediante farmacología clásica y ensayos de vías de señalización dirigidos, hallazgos previos sugieren que la clozapina y otros antipsicóticos atípicos se comportan principalmente como antagonistas neutros y/o agonistas inversos del receptor 5-HT2A. Sin embargo otros hallazgos más recientes muestran que los antispicóticos podrían también comportarse como agonistas de vías de señalización específicas. La fosforilación reversible es un elemento común en múltiples redes de señalización celular. Combinando un método de fosfoproteómica cuantitativa con el análisis de las redes de señalización hemos examinado el efecto del tratamiento de clozapina en el nivel general de fosforilazión de proteínas y de la transducción in vitro de cascadas de señalización en células de mamífero inducidas para expresar tanto el receptor humano 5-HT2AR como la variante H452Y del gen que codifica para el receptor 5-HT2AR. Esta variación natural del gen 5-HT2AR fue seleccionada porque se ha asociado de forma repetida con pacientes de esquizofrenia que no responden al tratamiento con clozapina. Nuestros datos muestran que un tiempo breve de exposición (5 ó 10 minutos) a clozapina (10-5 M) promueve la fosforilación de numerosos componentes de las vías de señalización implicadas en procesos como la endocitosis, la señalización de ErB, de insulina o de estrógenos. Las células inducidas a expresar la variante H452Y muestran un fosfoproteoma basal diferente, con incrementos en la fosforilación de los componentes de señalización de mTOR como ejemplo translacionalmente relevante. Sin embargo, el efecto de la clozapina en aspectos funcionales del fosfoproteoma fue significativamente reducido en células que expresan la construcción 5-HT2AR-H452Y. Tomándolo en conjunto, estos hallazgos sugieren que la clozapina se comporta como un agonista que induce la fosforilación de numerosas vías activadas por el receptor 5-HT2AR, y que el polimorfismo de un único nucleótido que codifica para el receptor 5-HT2AR-H452Y afecta esta fosforilación dependiente de redes de señalización inducida por clozapina.
mostramos una correlación positiva entre la accesibilidad en promotores e intrones, la expresión génica y las marcas de histonas activas. Al comparar los patrones de expresión y estructura de la cromatina en diferentes tejidos, pudimos inferir los elementos cis-reguladores que controlan la expresión génica específica de cada tejido y predecir los sitios de unión in vivo de los factores de transcripción relevantes. El ensayo ATAC-seq también permitió trazar un mapa preciso de las regiones reguladoras activas, incluyendo
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0006295221000368?via%3Dihub
