LINEAS DE INVESTIGACIÓN

Identificación y caracterización de secuencias reguladoras y funcionales contenidas en el elemento móvil L1Tc de Trypanosoma Cruzi.

Los elementos dispersos largos (LINE-1 o L1) son retrotransposones sin largas terminaciones terminales (LTR) presentes de manera abundante en los genomas de mamíferos que se movilizan, de forma autónoma, vía un RNA intermediario por un proceso que requiere de diversas actividades enzimáticas. Los elementos LINE parecen ser también los encargados de suministrar la maquinaria enzimática para la movilización de los SINE aunque se desconocen, en gran medida, las características enzimáticas y de funcionalidad de las proteínas que codifican. Interesantemente, el genoma de T. cruzi contiene un 30% de secuencias repetidas de tipo SINE y LINE, siendo estas esenciales para su biología.

En cuanto a elementos de DNA móviles nuestra investigación se centra en L1Tc, retrotransposon sin LTR de Trypanosoma cruzi.

La transcripción es el primer paso en la movilización de los LINEs y, por tanto, uno de nuestros objetivos es la caracterización y el análisis funcional de la secuencia promotora de L1Tc. También estamos interesados en conocer las propiedades enzimáticas y los requerimientos de la proteína bifuncional RT-RNasaH contenida en el elemento, así como identificar y caracterizar la secuencia en la que reside la actividad chaperona de ácidos nucleicos y de unión a los mismos presente en la proteína C2-L1Tc

Caracterización de proteínas recombinantes de Leishmania y Trypanosoma Cruzi como marcadores celulares de situación, progresión y control de Leishmaniosis en pacientes infectados con VIH y Leishmaniosis y enfermos chagásicos.

Protozoos parásitos del género Leishmania son los agente etiológicos de un amplio espectro de enfermedades graves en el hombre conocidas como leishmaniosis. A pesar de que existe inmunidad adquirida frente a Leishmania, la tasa de infección se está incrementando especialmente en pacientes inmunodeprimidos. El tratamiento específico es ineficiente y tóxico y no existe ninguna vacuna frente a esta enfermedad.
El control de enfermedad requiere la inducción de una repuesta inmune múltiple frente a varios y específicos antígenos del parásito. Nuestra investigación en esta área se centra en identificar proteínas y antígenos cuyas propiedades las hacen ser consideradas como buenos candidatos para desarrollar inmunoterapias eficientes frente a la leishmaniosis. Para ello estamos produciendo moléculas quiméricas de DNA compuestas por secuencias que codifican varias proteínas de Leishmania infantum asociadas a la molécula inmunomoduladora T-HSP70. La capacidad de estas moléculas de producir una repuesta inmune eficiente frente a la infección se lleva a cabo en un modelo experimental murino donde se analiza, como parámetros de infección, los patrones histológicos y el nivel de parasitemia en tejidos diana como bazo e hígado. La capacidad antigénica (humoral y celular) de dichas proteínas recombinantes también se testan en infección natural, en sueros y sangre periférica de pacientes infectados con HIV y Leishmania.
Trypanosoma cruzi es un protozoo parásito y el agente etiológico de la enfermedad de Chagas la cual está considerada, en la actualidad, como uno de los problemas más serios de salud de America Latina. La capacidad de respuesta celular del hospedador ante el parásito resulta esencial en la evolución y severidad de la mencionada enfermedad. Así, la identificación de células T respondedoras a determinados antígenos del parásito resultará útil para el establecimiento de marcadores del estado de la enfermedad y de su evolución.
Nuestra investigación en esta área pretende identificar marcadores celulares que permitan establecer conexiones entre las respuestas especificas encontradas en diferentes grupos de pacientes chagásicos a estos marcadores y la severidad de la enfermedad y evolución post-tratamiento de la misma. Para ello hemos aislado y caracterizado varios genes que codifican antígenos específicos de T. cruzi y purificado las correspondientes proteínas recombinantes. Así, estamos interesados en establecer una serie de parámetros, relacionados con respuestas humorales y celulares específicas que sean indicativos del estado de la enfermedad en pacientes chagásicos y de su evolución.

ORGANISMOS FINANCIADORES ÚLTIMOS 5 AÑOS

- AVANCES EN EL CONOCIMIENTO INMUNOLOGICO Y MOLECULAR PARA EL CONTROL DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS. PROYECTO, PN2019-Proyectos I+D+i "Retos Investigación", Ref: PID2019-109090RB-I00, (2020 - 2024).

- U01: new chemotherapy regimens and biomarkers for chagas disease. PROYECTO, NIH NIAID Clinical Trial Implementation Cooperative, Ref: INT-USA/0831, (2018 - 2023).

- ESTUDIO DEL CONTEXTO GENOMICO DE LOS RETROTRANSPOSONES EN TRYPANOSOMA CRUZI Y RELACION DE SUS SECUENCIAS FUNCIONALES CON LOS PROCESOS DE REGULACION DE LA EXPRESION GENICA. PROYECTO, PN2016 - PROY I+D+I - PRG. RETOS DE LA SOCIEDAD, Ref: SAF2016-80998-R, (2016 - 2020).

PUBLICACIONES ÚLTIMOS 5 AÑOS

-Garcia-Castro A; Egui Machado A; Thomas Carazo MC; Lopez Lopez Manuel Carlos, Humoral and Cellular Immune Response in Asymptomatic Dogs with Visceral Leishmaniasis: A Review., Vaccines, 2022, Vol. 10: 947, ARTÍCULO DE REVISIÓN, Id:894194

-Alonso-Vega, C.; Urbina, J.A.; Sanz, S.; Pinazo, M.J.; Pinto, J.J.; Gonzalez, V.R.; Rojas, G.; Ortiz, L.; Garcia, W.; Lozano, D.; Soy, D.; Maldonado, R.A.; Nagarkatti, R.; Debrabant, A.; Schijman, A.; Thomas, M.C.; López, M.C.; Michael, K.; Ribeiro, I.; Gascon, J.; Torrico, F.; Almeida, I.C., New chemotherapy regimens and biomarkers for Chagas disease: The rationale and design of the TESEO study, an open-label, randomised, prospective, phase-2 clinical trial in the Plurinational State of Bolivia, BMJ Open, 2021, Vol. 11: 12-e052897, ARTÍCULO, Id:868154

-Mateus J; Nocua P; Lasso P; López MC; Thomas MC; Egui A; Cuervo C; González JM; Puerta CJ; Cuellar A., CD8+ T cell response quality is related to parasite control in an animal model of single and mixed chronic Trypanosoma cruzi infections, Frontiers in cellular and infection microbiology, 2021, Vol. 11: 723121, ARTÍCULO, Id:865569

-Gómez, I.; Thomas, M.C.; Palacios, G.; Egui, A.; Carrilero, B.; Simón, M.; Valladares, B.; Segovia, M.; Carmelo, E.; López, M.C., Differential Expression of Immune Response Genes in Asymptomatic Chronic Chagas Disease Patients Versus Healthy Subjects, Frontiers in cellular and infection microbiology, 2021, Vol. 11: 722984, ARTÍCULO, Id:854449

-Gómez, I.; López, M.C.; Rastrojo, A.; Lorenzo-Díaz, F.; Requena, J.M.; Aguado, B.; Valladares, B.; Thomas, M.C., Variability of the Pr77 sequence of L1Tc retrotransposon among six T. cruzi strains belonging to different discrete typing units (DTUs), Acta Tropica, 2021, Vol. 222: 106053, ARTÍCULO, Id:852664

-Alonso-Padilla, J.; López, M.C.; Esteva, M.; Zrein, M.; Casellas, A.; Gómez, I.; Granjon, E.; Méndez, S.; Benítez, C.; Ruiz, A.M.; Sanz, S.; Gascón, J.; Thomas, M.C.; Pinazo, M.J.; Abril, M.; de Noya, B.A.; Jorge, T.A.; Chatelain, E.; Grijalva, M.J.; Guhl, F.; Hasslocher-Moreno, A.M.; Luquetti, A.O.; Noya, O.; Ramsey, J.M.; Ribeiro, I.; Longhi, S.A.; Schijman, A.G.; Sosa-Estani, S.; Torrico, F.; Viotti, R., Serological reactivity against T. cruzi-derived antigens: Evaluation of their suitability for the assessment of response to treatment in chronic Chagas disease., Acta Tropica, 2021, Vol. 221: 105990, ARTÍCULO, Id:851634

-Macías, F.; Afonso-Lehmann, R.; Carreira, P.E.; Thomas, M.C., TBP and SNAP50 transcription factors bind specifically to the Pr77 promoter sequence from trypanosomatid non-LTR retrotransposons, Parasites and Vectors, 2021, Vol. 14: 1-313, ARTÍCULO, Id:846906

-Pérez-Antón E; Egui A; Thomas MC; Carrilero B; Simón M; López-Ruz MÁ; Segovia M; López MC., A proportion of CD4+ T cells from patients with chronic Chagas disease undergo a dysfunctional process, which is partially reversed by benznidazole treatment., PLoS Neglected Tropical Diseases, 2021, Vol. 15: e00090592-e0009059, ARTÍCULO, Id:841082

-Cantos-Barreda, A.; Escribano, D.; Siriyasatien, P.; Cerón, J.J.; Thomas, M.C.; Afonso-Lehmann, R.N.; López, M.C.; Bernal, L.J.; Phumee, A.; Lubas, G.; Martínez-Subiela, S., Detection of Leishmania infantum DNA by real-time PCR in saliva of dogs, Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases, 2020, Vol. 73: 101542, ARTÍCULO, Id:815998

-Gómez, I.; Rastrojo, A.; Lorenzo-Diáz, F.; Sánchez-Luque, F.J.; MacIás, F.; Aguado, B.; Valladares, B.; Requena, J.M.; López, M.C.; Thomas, M.C., Trypanosoma cruzi Ikiakarora (TcIII) Draft Genome Sequence, Microbiology Resource Announcements, 2020, Vol. 9: 27-e00453-20, ARTÍCULO, Id:815969

-Gómez, I.; Rastrojo, A.; Sanchez-Luque, F.J.; Lorenzo-Díaz, F.; Macías, F.; Valladares, B.; Aguado, B.; Requena, J.M.; López, M.C.; Carmen Thomas, M., Draft Genome sequence of the trypanosoma cruzi B. M. López strain (TCIA), isolated from a Colombian patient, Microbiology Resource Announcements, 2020, Vol. 9: 18-e00031-20, ARTÍCULO, Id:809266

-Alonso-Padillaid, J.; Abril, M.; de Noya, B.A.; Almeida, I.C.; Angheben, A.; Jorge, T.A.; Chatelain, E.; Esteva, M.; Gascón, J.; Grijalva, M.J.; Guhl, F.; Hasslochermoreno, A.M.; López, M.C.; Luquetti, A.; Noya, O.; Pinazo, M.J.; Ramsey, J.M.; Ribeiro, I.; Ruiz, A.M.; Schijman, A.G.; Sosa-Estani, S.; Carmen Thomas, M.; Torrico, F.; Zreinid, M.; Picado, A., Target product profile for a test for the early assessment of treatment efficacy in chagas disease patients: An expert consensus, PLoS Neglected Tropical Diseases, 2020, Vol. 14: 1-10, ARTÍCULO, Id:808851

-Pérez-Antón, E.; Egui, A.; Thomas, M.C.; Simón, M.; Segovia, M.; López, M.C., Immunological exhaustion and functional profile of CD8+ T lymphocytes as cellular biomarkers of therapeutic efficacy in chronic Chagas disease patients, Acta Tropica, 2020, Vol. 202: 105242, ARTÍCULO, Id:804208

-Egui, A.; López, M.C.; Gómez, I.; Simón, M.; Segovia, M.; Thomas, M.C., Differential phenotypic and functional profile of epitope-specific cytotoxic CD8+ T cells in benznidazole-treated chronic asymptomatic Chagas disease patients, Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Basis of Disease, 2020, Vol. 1866: 3-165629, ARTÍCULO, Id:790664

-Franco-Martínez, L.; Villar, M.; Tvarijonaviciute, A.; Escribano, D.; Bernal, L.J.; Cerón, J.J.; Thomas, M.d.C.; Mateos-Hernández, L.; Tecles, F.; de la Fuente, J.; López, M.C.; Martínez-Subiela, S., Serum proteome of dogs at subclinical and clinical onset of canine leishmaniosis, Transboundary and Emerging Diseases, 2020, Vol. 97: 318-327, ARTÍCULO, Id:774803

-Cantos-Barreda, A.; Escribano, D.; Egui, A.; Thomas, M.C.; López, M.C.; Tecles, F.; Bernal, L.J.; Cerón, J.J.; Martínez-Subiela, S., One-year follow-up of anti-Leishmania antibody concentrations in serum and saliva from experimentally infected dogs, International Journal for Parasitology, 2019, Vol. 49: 893-900, ARTÍCULO, Id:771543

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-Franco-Martínez, L.; Tvarijonaviciute, A.; Horvati¿, A.; Guillemin, N.; Bernal, L.J.; Bari¿ Rafaj, R.; Cerón, J.J.; Thomas, M.d.C.; López, M.C.; Tecles, F.; Martínez-Subiela, S.; Mrljak, V., Changes in saliva of dogs with canine leishmaniosis: A proteomic approach, Veterinary Parasitology, 2019, Vol. 272: 44-52, ARTÍCULO, Id:767572

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-Risueño, J.; Spitzová, T.; Bernal, L.J.; Muñoz, C.; López, M.C.; Thomas, M.C.; Infante, J.J.; Volf, P.; Berriatua, E., Longitudinal monitoring of anti-saliva antibodies as markers of repellent efficacy against Phlebotomus perniciosus and Phlebotomus papatasi in dogs, Medical and Veterinary Entomology, 2019, Vol. 33: 99-109, ARTÍCULO, Id:743780

-Egui A; Ledesma D; Pérez-Antón E; Montoya A; Gómez I; Robledo SM; Infante JJ; Vélez ID; López MC; Thomas MC, Phenotypic and Functional Profiles of Antigen-Specific CD4+ and CD8+ T Cells Associated With Infection Control in Patients With Cutaneous Leishmaniasis., Frontiers in cellular and infection microbiology, 2018, Vol. 8: 393-393, ARTÍCULO, Id:756009

-Pérez-Antón, E.; Egui, A.; Thomas, M.C.; Puerta, C.J.; González, J.M.; Cuéllar, A.; Segovia, M.; López, M.C., Impact of benznidazole treatment on the functional response of Trypanosoma cruzi antigen-specific CD4+CD8+T cells in chronic Chagas disease patients, PLoS Neglected Tropical Diseases, 2018, Vol. 12: 5-e0006480, ARTÍCULO, Id:723199

-Macías, F.; Afonso-Lehmann, R.; López, M.C.; Gómez, I.; Carmen Thomas, M., Biology of trypanosoma cruzi retrotransposons: From an enzymatic to a structural point of view, Current Genomics, 2018, Vol. 19: 110-118, ARTÍCULO DE REVISIÓN, Id:715936

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